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Técnicas especiales comunes de tinción e histoquímica
Técnicas especiales comunes de tinción e histoquímica. La tinción especial se refiere a la técnica de tinción de secciones de tejido en oposición a la tinción ordinaria (convencional), a saber, tinción con hematoxilina y eosina (HE).
Teoría básica
Punto de conocimiento 1: El significado del teñido especial.
La tinción especial se refiere a la técnica de tinción de secciones de tejido en oposición a la tinción ordinaria (convencional), a saber, tinción con hematoxilina y eosina (HE). Utiliza principalmente las diferencias en las propiedades físicas de los tejidos y las células para teñir tintes, la tasa de absorción y pérdida, para teñir los tejidos, a fin de mostrar ciertos componentes específicos en los tejidos y células normales y patológicos, como el tejido conectivo, el tejido muscular y tejido nervioso. , Lípidos, carbohidratos, proteínas y ácidos nucleicos, pigmentos, amiloides, inorgánicos, gránulos citoplasmáticos de células neuroendocrinas y otros orgánulos, microorganismos patógenos, tejidos sanguíneos y linfáticos, tejidos óseos y cartilaginosos, etc.
Punto de conocimiento 2: El significado de la tecnología histoquímica
La tecnología histoquímica se refiere principalmente a la tecnología de mostrar algunos componentes químicos especiales en tejidos y células en secciones de tejido, utilizando reactivos incoloros para reaccionar químicamente con un determinado componente en tejidos y células para generar productos precipitados coloreados in situ.
Aplicación de indicaciones y análisis y juicio
Punto de conocimiento 1: Aplicación de la tintura de tres colores.
En la actualidad, el método más utilizado es el método de teñido de tres colores de Masson.
La tinción de tres colores se utiliza principalmente para distinguir las fibras de colágeno de las fibras musculares y otros componentes, incluidos los siguientes aspectos:
⑴ Diferenciar el tejido cicatricial del amiloide o la celulosa.
(2) Diferenciar si el tumor de células fusiformes es fibroso, miogénico o neurogénico.
⑶ Se confirmó que había una pequeña cantidad de fibras de colágeno en proliferación entre los lóbulos de la cirrosis hepática temprana.
⑷ La cicatriz en el infarto de miocardio se confirmó en la autopsia.
Conocimiento 2: Aplicación del teñido de fibra reticulada
El teñido de fibra reticulada se puede utilizar para confirmar la fibra reticulada y la membrana base. El diagnóstico y la aplicación de la tinción de fibras reticulares en patología se muestran en la tabla.
| Número de serie | Diagnóstico diferencial | contenido |
| 1 | Cáncer y sarcoma | Las fibras del retículo rodean el nido de células cancerosas y, en la mayoría de los sarcomas, rodean cada célula tumoral. |
| 2 | Hemangioendotelioma y hemangiopericitoma | Las primeras células tumorales están ubicadas en el stent de fibra reticular de la pared de los vasos sanguíneos, y las últimas están ubicadas fuera del stent de fibra reticular de la pared de los vasos sanguíneos, y las fibras reticulares rodean radialmente las células tumorales. |
| 3 | Lesiones de los ganglios linfáticos benignas y malignas | El armazón de fibras reticulares de las lesiones benignas se puede retener claramente, mientras que el armazón de fibras reticulares del linfoma maligno se aprieta o destruye y desaparece, y la fibra reticular que rodea el nido del cáncer puede verse en el cáncer metastásico de ganglios linfáticos. |
| 4 | Tumores del sistema nervioso central | No hay fibras reticulares en las células tumorales y glial del astrocitoma. Las fibras reticulares se encuentran dispersas en el tumor en el meningioma, mientras que las fibras reticulares en proliferación se encuentran alrededor del nido del cáncer o entre las células tumorales en el cáncer metastásico o el sarcoma. |
| 5 | Carcinoma in situ y carcinoma invasivo temprano | La primera membrana basal está intacta, la última membrana basal se rompe y desaparece. Es más fácil juzgar si el teñido PAS se realiza al mismo tiempo. |
| 6 | Tuberculosis y sarcoidosis | La tuberculosis proliferativa no tiene necrosis caseosa evidente, pero las fibras reticulares de la lesión se reducen o desaparecen, mientras que las fibras reticulares dentro y fuera del granuloma sarcoide permanecen o aumentan |
| 7 | Enfermedad del higado | La hepatitis activa crónica tiene fibrosis leve y aumento de fibras reticulares, mientras que el andamio de fibras reticulares se destruye y desintegra en el área necrótica y aumentan las fibras de colágeno; La cirrosis hepática congestiva crónica puede mostrar la proliferación de fibras reticulares alrededor de la vena central y la vena lobulillar inferior. |
| 8 | otro | La biopsia de riñón en la enfermedad renal crónica o la diabetes puede confirmar un engrosamiento significativo de la membrana basal |
Punto de conocimiento 3: Aplicación del teñido de fibras elásticas
El diagnóstico y la aplicación de la tinción de fibras elásticas en patología se muestran en la tabla.
| Número de serie | Diagnóstico diferencial | contenido |
| 1 | Fibromas elásticos | No es fácil distinguir entre fibras elásticas y fibras de colágeno en cortes HE. La tinción de fibras elásticas puede mostrar claramente fibras elásticas granulares, esféricas, de fibra gruesa de color azul oscuro oscuro en el tumor. |
| 2 | Invasión temprana del carcinoma ductal de mama | En el carcinoma ductal in situ, no hay hiperplasia de fibras elásticas alrededor del conducto y la pared de los vasos sanguíneos, y aparece hiperplasia de fibras elásticas en la infiltración temprana. |
| 3 | Fibrosis elastina, pseudotumor elastina, liquen enfermedad esclerosante atrófica, laxitud de la piel y esclerodermia | La hiperplasia, rizado, desnaturalización y desintegración de fibras elásticas en la dermis de ciertas enfermedades de la piel se encuentran en hiperelastina, pseudotumor de elastina, liquen escleroso atrófico, laxosis cutánea y esclerodermia, etc. |
| 4 | Fibrosis endocárdica y coronaria | La fibrosis elástica endocárdica y de la arteria coronaria aumenta anormalmente las fibras elásticas y aumenta el nivel de fibras elásticas en los vasos sanguíneos renales de la nefropatía hipertensiva. |
| 5 | Aterosclerosis y aortitis sifilítica | En la aterosclerosis y la aortitis sifilítica, las fibras elásticas de la pared arterial están dañadas, rotas y desintegradas focalmente, y la rotura de la placa elástica en el vaso sanguíneo durante el trasplante de riñón indica el rechazo del injerto. |
| 6 | Bronquitis crónica, enfisema, bronquiectasia | Se confirma que ciertas enfermedades como bronquitis crónica, enfisema, bronquiectasias y fibras elásticas muestran degeneración y destrucción cuando se lesiona el ligamento amarillo. |
Punto de conocimiento 4: Aplicación del teñido con ácido periódico-Schiff (PAS)
El método de tinción PAS se puede utilizar para confirmar el glucógeno, el moco neutro, la membrana basal, ciertos hongos y parásitos.
(1) Tumores que se ha confirmado que contienen glucógeno: como carcinoma hepatocelular, carcinoma de células claras renal, glucogenoma de pulmón, carcinoma de células claras de ovario, hidradenoma de células claras, tumor de Brenner, sarcoma esquelético y sarcoma de Ewing.
⑵ Glucógeno confirmado: acumulación de glucógeno confirmada en el hígado, miocardio, músculo esquelético, riñón y sistema celular de macrófagos mononucleares durante la acumulación de glucógeno.
(3) Muestra el depósito de partículas de glucógeno: muestra el depósito de partículas de glucógeno en múltiples órganos (hígado, miocardio y túbulos contorneados renales) en la diabetes.
⑷ Confirmar algunos hongos PAS positivos: como Candida albicans, histoplasma capsularis, Cryptococcus y blastomycetes.
⑸ Identifique glucógeno, lípidos, etc. en las células de las vacuolas: identifique el glucógeno, los lípidos u otras sustancias en las células de las vacuolas combinando tinción de grasas.
⑹ Confirmación del avance de la membrana basal en el cáncer temprano: combinado con el método de tinción con plata para confirmar si existe un avance de la membrana basal en el cáncer temprano y el evidente engrosamiento de la membrana basal del capilar glomerular en algunas nefropatías.
⑺Diagnóstico e identificación de tumores PAS positivos: combinado con otros métodos de tinción de carbohidratos para diagnosticar e identificar tumores PAS positivos.
⑻Se confirma que la isquemia miocárdica conduce a una reducción significativa del glucógeno en el miocardio: una reducción significativa del glucógeno en el miocardio provocada por la isquemia miocárdica también puede confirmarse mediante tinción PAS.
Punto de conocimiento 5: Aplicación de hematoxilina del ácido fosfotúngstico (PTAH)
La tinción con hematoxilina con ácido fosfotúngstico se utiliza principalmente para confirmar los microfilamentos intracitoplasmáticos, como los que se encuentran en las fibras musculares y las células gliales. La glía, las fibras musculares, la celulosa y el núcleo son de color azul púrpura. Las franjas horizontales del músculo esquelético son claramente visibles. Las fibras del retículo, las fibras de colágeno, el cartílago y el hueso son de color rojo rosa o amarillo, y las fibras elásticas son de color púrpura leve.
Punto de conocimiento 6: la aplicación del teñido de moco.
La aplicación de la tinción de moco en patología se muestra en la tabla.
| Número de serie | Diagnóstico diferencial | contenido |
| 1 | Tumor epitelial mucinoso | Cáncer gástrico PAS positivo indica cáncer gástrico de tipo gástrico, cuando PAS negativo y AB positivo, indica cáncer gástrico de tipo intestinal que se produce sobre la base de metaplasia intestinal |
| 2 | Carcinoma cromófobo de células renales | El carcinoma de células renales cromófobo es positivo para el hierro coloidal Hale (azul) y se puede distinguir de otros tipos de carcinoma de células renales, que son todas reacciones negativas. |
| 3 | Tumor mesenquimatoso mucinoso | El moco en el mixoma, liposarcoma mixoide y mixofibrosarcoma es ácido hialurónico, la tinción AB es positiva, pero en la primera digestión con hialuronidasa, la reacción de tinción se vuelve negativa, el moco del condrosarcoma mucoide extraóseo es un moco sulfato fuerte. reacción positiva de la tinción AB |
| 4 | Cordoma, sarcoma sinovial y carcinoma mucoepidermoide, adenocarcinoma mucinoso | La combinación de la tinción de PAS y otras tinciones de moco puede confirmar que algunos tumores como el cordoma y el sarcoma sinovial contienen tanto moco como glucógeno, y otros tumores como el carcinoma mucoepidermoide y el adenocarcinoma mucinoso contienen solo moco pero no glucógeno. |
Punto de conocimiento 7: la aplicación de tinción grasa neutra
(1) Diagnóstico y diagnóstico diferencial de liposarcoma y tumores de glándulas sebáceas.
⑵ Diferenciar el tumor de la membrana folicular y el fibroma ovárico, el primero es positivo para la tinción de grasa neutra y el segundo es negativo.
⑶Diagnóstico y diagnóstico diferencial de otros tumores lipídicos, como xantomas, tumores de la corteza suprarrenal, histiocitoma fibroso maligno.
⑷ Muestra que en las enfermedades por almacenamiento de lípidos (como la enfermedad de Gaucher, la enfermedad de Nieman Pick, la enfermedad de HSC), las células de los tejidos depositan una gran cantidad de lípidos.
⑸ Confirmar embolia intravascular causada por grasa (embolia grasa).
⑹ Confirmar la degeneración grasa en ciertos órganos (como corazón, hígado, riñón).
Punto de conocimiento 8: la aplicación de la tinción amiloide
⑴ Confirmar alguna inflamación crónica, como el depósito de amiloide en la osteomielitis crónica y las lesiones por tuberculosis.
(2) Confirmar la presencia de amiloide en algunos tumores para realizar el diagnóstico y diagnóstico diferencial, como mieloma, enfermedad de cadenas pesadas, macroglobulinemia de Waldensrom, carcinoma medular de tiroides, carcinoma de células pequeñas de pulmón y tumor de células de los islotes.
⑶ ciertas enfermedades genéticas confirmadas (como fiebre mediterránea familiar, enfermedad neurológica familiar por depósito de amiloide), enfermedades alérgicas (como artritis reumatoide, dermatomiositis, esclerodermia y enteritis segmentaria), hemodiálisis y depósito de amiloide en el corazón y el cerebro de los ancianos.
⑷Diagnóstico y diagnóstico diferencial de la amiloidosis localizada (amiloidoma). Los amiloidomas en la garganta, la lengua, los pulmones, la piel, los ojos y la vejiga se pueden mostrar mediante tinción amiloide para compararlos con otros tumores y tumores. -Lesiones similares (como pólipos de cuerdas vocales, tumores de células de la granulosa, epitelioma calcificado y pseudotumor inflamatorio, etc.).
Punto de conocimiento 9: la aplicación de la tinción con argirófilos pro-galaxia
La tinción de células plata-fílica y plata-fílica se utiliza principalmente para confirmar células neuroendocrinas y tumores relacionados.
La mayoría de los tumores neuroendocrinos gastrointestinales (carcinoides) son positivos para tinción silverofílica, mientras que algunos son positivos para tinción silverofílica (principalmente carcinoides que se originan en el intestino medio, algunos se originan en el intestino grueso), tumores neuroendocrinos en otras partes, como el carcinoma medular de tiroides. , adenoma hipofisario, tumor de células de los islotes pancreáticos, carcinoma de células de Merkel y carcinoma de células pequeñas de la piel, en su mayoría teñidos positivamente para silverofilia. Además, estos métodos de tinción con plata también se pueden utilizar para verificar las fibras de la red y la melanina.
Punto de conocimiento 10: la aplicación del teñido con pigmentos
Los métodos de tinción más utilizados en el diagnóstico patológico son la tinción con hemosiderina y melanina. El teñido con pigmentos se utiliza principalmente para:
⑴Identifique el pigmento como hemosiderina, melanina u otros pigmentos (como lipofuscina, pigmento similar a cera, pigmento de formaldehído, carbón vegetal, etc.).
⑵El método del azul de Prusia puede confirmar que una gran cantidad de hemosiderina se deposita en las células de los tejidos en la hemocromatosis, y puede mostrar que las células de insuficiencia cardíaca en los alvéolos durante la congestión pulmonar crónica y la hemosiderina depositada en las células de los tejidos en el hígado, también se pueden confirmar el bazo y los ganglios linfáticos. Muestra sangrado en el tejido, especialmente en la zona de sangrado de sangrado e infarto antiguos.
⑶La tinción con melanina puede confirmar melanoma maligno y otras enfermedades que contienen melanina (como tumor de Bednar, sarcoma de células claras, neuroma melanótico infantil, linfadenopatía dermatológica, melanosis, acantosis nigricans, carcinoma de células basales y queratosis seborreica, etc.).
⑷ En combinación con otros métodos de tinción, distingue la melanosis de la pseudomelanosis (melanosis del colon) y la hemocromatosis. La melanosis es positiva para la tinción con melanina, y la pseudomelanosis y la hemocromatosis son negativas para la tinción con melanina. La tinción con azul de Prusia fue débilmente positiva, la tinción con PAS fue positiva, la última tinción con azul de Prusia fue fuertemente positiva y la tinción con PAS fue negativa.
Punto de conocimiento 11: el papel de la histoquímica enzimática
⑴ Diagnóstico de acetilcolinesterasa en la enfermedad de Hirschsprung.
(2) Confirmar las enzimas relacionadas con el músculo esquelético de varias miopatías.
⑶ Confirmar la fosfatasa ácida en el tumor de células gigantes de hueso y otras células gigantes de osteoclastos (método de la fosfatasa ácida de Duray), este método también se puede realizar en secciones de parafina.
⑷ Confirmar la cloroacetato esterasa de células mieloides y mastocitos (método de Leder). Esta enzima puede confirmarse en secciones de parafina fijadas en solución de formaldehído, y la reacción positiva es roja.
⑸ Confirmar la tirosinasa (reacción DOPA) de los melanocitos y sus tumores.
⑹ El cáncer de próstata y el cáncer de próstata metastásico se pueden confirmar mediante la fosfatasa ácida prostática (PAP).
(fuente: internet, solo referencia)